pcr實(shí)驗室建設規劃要點(diǎn)

PCR實(shí)驗室又叫基因擴增實(shí)驗室，是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復制。通過(guò)DNA基因追蹤系統，能迅速掌握患者體內的病毒含量，其精確度高達納米級別。博泰小編帶大家了解pcr實(shí)驗室建設規劃的要點(diǎn)有哪些。

一、PCR實(shí)驗室建設規劃要點(diǎn)

1、主體結構： 

主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金50內圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問(wèn)題。結構牢固，線(xiàn)條簡(jiǎn)明，美觀(guān)大方，密封性好。

2、標準的三區分隔和氣壓調節：

將PCR過(guò)程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個(gè)獨立的實(shí)驗區。整個(gè)區域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨立實(shí)驗區設置有緩沖區，同時(shí)各區通過(guò)氣壓調節，使整個(gè)PCR實(shí)驗過(guò)程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染?？纱蜷_(kāi)緩沖區Ⅰ，緩沖區Ⅱ和 PCR 擴增區的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗區的外墻上和各扇門(mén)上都安裝有風(fēng)量可調的回風(fēng)口，空氣通過(guò)回風(fēng)口向室內換氣。

3、消毒：

在三個(gè)實(shí)驗區和三個(gè)緩沖區頂部以及傳送窗內部安裝有紫外燈，供消毒用。

在試劑準備區和標本制備區 還設置移動(dòng)紫外線(xiàn)燈，對實(shí)驗桌進(jìn)行局部消毒。

4、機械連鎖不銹鋼傳遞窗：

試劑和標本通過(guò)機械連鎖不銹鋼傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過(guò)程中不受污染。 

5、地面

地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒(méi)有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚接縫需要小于2mm。

6、照明

燈具要選用凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。在建設的過(guò)程中應注意：

1、規范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。 

2、嚴格按照規范科學(xué)設計的安裝流程。

3、安裝前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進(jìn)線(xiàn)位置，電話(huà)網(wǎng)絡(luò )線(xiàn)進(jìn)線(xiàn)位置，進(jìn)水水壓，地面平整度，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。

二、設計要點(diǎn)

PCR實(shí)驗室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗，通常應經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗過(guò)程，若實(shí)驗工藝需要，還應增加樣品粉碎過(guò)程。

1、分散形式PCR實(shí)驗室

所謂分散形式PCR實(shí)驗室，是指完成上述實(shí)驗過(guò)程的實(shí)驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實(shí)驗室，由于各個(gè)實(shí)驗之間不易相互干擾，因此無(wú)需特殊條件要求。

2、組合形式PCR實(shí)驗室

所謂組合形式PCR實(shí)驗室,是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗過(guò)程的實(shí)驗用房相鄰布置，組成獨立實(shí)驗區域的形式。對于組合形式PCR實(shí)驗室，由于各個(gè)實(shí)驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間，以減少室內外空氣交換。

三、主要設備試劑準備區 

儀器設備主要有冰箱、超凈臺、加樣器、混勻器、天平和離心機等，加樣器、天平除了要專(zhuān)用外，還應有定期校準。試劑分裝應在超凈臺中進(jìn)行擴增反應混合液應使用分子生物學(xué)級的，試劑制備好后應有質(zhì)檢：是否有污染、是檢測試劑的擴增效果。

1、標本制備區 

儀器設備主要有生物安全柜、加樣器、離心機、溫育儀、混勻器等 

2、擴增區 

擴增區的主要儀器是核酸擴增儀、超凈臺、微量加樣器、離心機、可移動(dòng)紫外燈。擴增儀需進(jìn)行校準。并配備UPS電源，以防止由于電壓的波動(dòng)，停電對擴增效果的影響。

3、分析區 

本區所使用的儀器設備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等 潔凈實(shí)驗區的緩沖間部分面積不能超過(guò)主實(shí)驗室的八分之一,這是有規定的。 

四、不可忽略的設計

1.實(shí)驗室空調通風(fēng)系統設計及壓力控制 

PCR實(shí)驗室并沒(méi)有嚴格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗區域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí)，要嚴格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗區的壓力要求。

2.污染的預防與控制  

PCR實(shí)驗室設計的核心問(wèn)題是如何避免污染。在實(shí)際工作中，常見(jiàn)的有以下幾種污染類(lèi)型：擴增產(chǎn)物的污染；天然基因組DNA的污染；試劑的污染以及標本間的污染。由于一旦發(fā)生污染，實(shí)驗就必須停止，直到找到污染源為止，而且實(shí)驗結果必須作廢，需重新進(jìn)行實(shí)驗。所以發(fā)生污染后再?lài)@實(shí)驗室來(lái)尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣，浪費人力物力。因此要避免污染，先應是預防，而不是排除。

五、*的嚴格管理

1、嚴格控制進(jìn)出實(shí)驗室的人員。與實(shí)驗無(wú)關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實(shí)驗室，有條件的情況下要設置獨立的通道和進(jìn)出整個(gè)實(shí)驗區的門(mén)； 

2、盡量減少在實(shí)驗區內不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性。 

3、擴增產(chǎn)物分析區是主要的擴增產(chǎn)物污染來(lái)源，廢液不能在實(shí)驗室中傾倒，必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠離實(shí)驗室的地方棄掉，用過(guò)的吸頭等一次性材料也應經(jīng)消毒液浸泡消毒后統一處理，如焚燒等； 

4、擴增產(chǎn)物分析區可能會(huì )用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，應特別注意實(shí)驗人員的安全防護。